杨树菇菌种分离的方法有哪些？杨树菇的做法有什么？
1、杨树菇菌种分离的方法有哪些？
杨树菇和大多数木生型菇菌1样，其纯菌种可用孢子分离法、组织分离法或菇木分离法获得。通常以交叉使用前两种分离方法为主。前面已经说过，我国杨树菇的单孢子菌株具有结实能力，因此在进行孢子分离时，可采用单孢分离法获得纯菌种，经过出菇鉴定后，挑选优良菌株作母种使用。或在生产上使用的优良菌株中，选取生长健壮、形态正常、无病虫害的幼嫩子实体作为分离材料，按照组织分离的无菌操作程序分离接种。以下简要介绍单孢分离法和出菇鉴定要求。1.单孢分离法（1）单孢稀释分离法 将选择好的种菇置于孢子弹射分离装置内进行孢子弹射，收集孢子（弹射分离方法见黄伞有关部分）。然后对收集的孢子用无菌水进行稀释分离。将稀释后的孢子悬浮液滴在载玻片上，放在低倍镜下进行检查，至每滴中有4～5个孢子为合适。接种时，用注射器吸取孢子悬浮液，将试管棉塞拔松，沿试管壁插入注射器针头，每支试管注入1～2滴孢子悬浮液，转动试管，使孢子均匀地分布在培养基表面，静置1～2小时后，移入温箱培养。也可将已稀释的孢子悬浮液注入培养皿内，每个培养皿加1～2滴即可，然后倒入已溶化并冷却到45℃的琼脂培养基，厚0.5厘米，在工作台上左右旋转混匀，静置1～2小时，倒转培养。孢子萌发后，将单孢菌落连同少许培养基移接到试管内培养。（2）单孢定位切割分离法 浙江省农业科学院园艺研究所范雷法等（1996）曾介绍1种自制简易定位切割器，能快速、准确的分离单孢菌落。定位切割器制作方法如下：选用普通圆珠笔芯塑料空管1小段，长2～3厘米，用刀片将空管1端削成薄片，另1端用火熔化压成平头，用1只乳胶指套，在其中间打1孔，插上上述做好的塑料平头，将其固定在40或100倍显微镜的镜头上，使其紧密接触。切割器的尖头部分，要削得薄、长而光滑，使之能切割完好，为粘连切割圈外的培养基；切割器与物镜固定要紧，且位置在正中，使物镜与笔芯空管处于同1轴心上。做成之后用以下方法进行校正：在载玻片或培养皿上倒入1薄层（厚2～3毫米）水样琼脂培养基，凝固后，用带有定位器的物镜镜头，轻轻转动上下调节器，使定位切割器下降，并切割到培养基的2/3处，勿切割到底，以免损坏定位器和琼脂培养基的表面；再转动调节器，使定位切割器上升，用低倍镜观察定位切割器切割后的培养基块是否在视野正中，如果不在正中，则应对乳胶指套的相对位置进行调节，至适合要求。如显微镜是以载物台作为上下调节的，也可用同样方法校正。1般普通笔芯内径在2毫米左右，约是低倍镜的2倍左右视野。定位切割器使用前浸泡在酒精内消毒备用。按常规方法将孢子稀释后制成PDA琼脂平板，在低倍镜下检查，若确认为单孢，则可改用定位切割器进行切割，按上述方法在同1培养皿内将单孢切割完毕。再将金属针打扁，使尖端平而稍弯曲，用来在培养皿内挑取切割块，要尽量避免碰到圈外培养基，然后移置在斜面上培养。（3）试管稀释点样法 用灭菌接种针在培养皿内蘸取少量担孢子，或用接种针直接从菌褶上轻轻刮取少量孢子，洗入试管内的无菌水中，充分摇动，使之均匀分散。然后用灭菌接种针蘸取1滴孢子液，放在载玻片上，用低倍镜检查，如果每滴水中仍有3～4个孢子，应继续稀释，至每滴中含1～2个孢子为止。将水滴滴在培养皿盖的边缘2厘米处，再用低倍镜检查，将只有1个担孢子的水滴用蜡笔在反面作标记，并加1滴营养液。为防止培养液过快蒸发，在培养皿内加少许无菌水，用纸包好进行培养。第2天，孢子萌发，经镜检，确认为只有1个芽管，可以在水滴上加1小片琼脂块，以便孢子萌发后继续生长。2～4天后，将菌丝连同琼脂块移到试管内培养。（4）毛细管切割法 将不同稀释度的孢子悬浮液滴入培养皿的琼脂平板上，每个培养皿放1～1.5毫升，停留几分钟后，倒去多余的水，进行保温培养。孢子发芽后，在低倍镜下用毛细管割取只有1个芽管的单孢子，移接到琼脂斜面上培养。2.多孢分离法 按常规方法准备好琼脂平板培养基，用灭菌纱布或滤纸吸去皿盖反面的冷凝水。从杨树菇子实体上剪下1小块菌盖，菌盖下约有6～7片菌褶，再将菌褶的前端和基部剪去，留下的菌褶长约1.5～2厘米，再盖到培养皿上，放到温室培养。6小时后，将培养皿盖按顺时针方向移动若干度（不得小于30度），以后每隔3～4小时按同样方向移动若干度，最后回复到原来位置。然后，移去分离材料，将培养皿放在适温下培养，在平板上会出现不同密度的菌落，挑选分散性较好，且又连接成片的菌落，转入试管内培养。用这种方法，能及时发现混入伞菌孢子内的杂菌。或将1小片菌褶贴附在试管壁上，使孢子直接散落在斜面上。3.组织分离法 选取肉厚、朵大、无病虫害、67分成熟的子实体作种菇用，已开始弹射孢子的不可作种菇。将选好的种菇用自来水冲洗数次，再用无菌水冲洗数次，然后用无菌纱布或滤纸吸干水分。在接种箱内按无菌操作方法进行组织分离。用手将种菇盖边轻轻撕开，手指不要接触撕开后露出的菌肉部门。将解剖刀在火焰上烧灼灭菌，待冷却后，在菌盖和菌柄或菌盖与幼嫩菌褶连接处挖取1小块（约绿豆粒大小），接种在斜面上。在切取组织块时，不要挖取接近菌盖边缘的部分，以减少杂菌污染。接种时，将组织块准确地接种在斜面的中央，切勿在斜面上到处移动，这样便于及时鉴别组织块是否有细菌污染，或当污染出现后便于进行纯化分离。接种后，将斜面置于23～25℃下培养，若组织块上有白色菌丝萌发，并向培养基上蔓延，1～2天后，及时用接种针挑取少量带有菌丝的培养基，接种到空白斜面上进行纯化培养，即可获得杨树菇母种。组织分离时，组织块附近若出现霉菌污染，因霉菌丝与杨树菇菌丝生长速度相近或更快，故予淘汰。如果组织块附近出现灰白色或黄白色黏状物或水渍样物，则是细菌、酵母菌污染的表现。这时可降低培养温度，抑制污染菌落的生长，当杨树菇菌丝的菌落长到细菌（酵母）菌落之外时，则可采用切割菌落前端的方法进行纯化，也可得到杨树菇的纯培养物。当菌丝长满斜面时，检查培养基的背面，若在杨树菇菌丝的下面出现黄褐色的斑块，则是被菌丝覆盖的细菌（酵母）菌落，可用切割菌丝生长前端的方法再次进行纯化培养，有时这种纯化分离要连续进行多次才能获得纯菌种。这种方法只是1种辅助措施，只有当组织分离的绝大部分斜面都被污染时，才可以采用这种纯化分离法获得母种。4.出菇鉴定 为了检验所分离单孢子菌株是否具有结实能力，出菇特性以及产量水平，对分离物要进行出菇鉴定。此工作可分别在液体培养基和固体培养基上进行。（1）液体出菇 鉴于杨树菇易于在液体培养基中生长，出菇试验可采用液体培养。培养液的组成为：玉米粉25克，豆饼粉10克，葡萄糖10克，硫酸镁1克，磷酸2氧钾2克，蒸馏水（或自来水）1000毫升。将上述培养液分装于1000毫升3角瓶中，每瓶装量200～250毫升，按常规进行高压灭菌备用。接种后于25℃静置培养，约15天左右，在培养液表面陆续开始分化原基，并形成正常子实体。在25℃有散射光条件下，绝大多数单孢菌株在15～20天均能分化原始，但出菇时间的早晚与产量没有正相关性。出菇早虽然是1个良好的生产性状，但在出菇较晚的菌株中，也可发现出菇密度高，菇潮集中，产量高的优良菌株，这些考核要在固体培养基上进行。采用液体培养进行出菇试验，不但方法简单，便于观察，且便于比较在同1单位时间内，不同菌株间的生物量（将滤取菌丝用水淋洗干净，与子实体分别置于60℃烘干到恒重，用电子天平称量）。另1特点是在短时间内即可达到出菇试验的目的。（2）袋式栽培 袋栽培养料组成为：阔叶树木屑37%，棉籽壳37%，麦麸20%，玉米粉5%，石膏1%，调含水量为65%。每袋装料300克，于称量后分装于塑料袋中，按常规方法进行高压或常压灭菌备用。接种后在25℃培养，待菌丝满袋后，将菌袋移至供出菇试验的栽培室内，每个供试菌株1般不得少于20袋，随机排列在床架上，并在同1环境条件下进行栽培管理。待原基分化后，脱去塑料袋，随后进行水分、光照和通风管理。比较其生产性状和产量。选择原基分化早，菇丛密，菇数多，单菇粗壮，生物学效率高，抗性好的优良菌株用于生产。
2、杨树菇的做法有什么？
杨树蘑菇是我国最重要食用菌之1，这种蘑菇也叫柱状田头菇，由于它多以杨树的木屑为主要生长原料，人们又喜欢把它叫做杨树菇。杨树菇烧肉材料: 5花肉 杨树菇 青蒜苗大蒜 小茴香 红糖 盐 耗油 生姜 干辣椒 8角 黄酒 酱油 老抽做法:
1、将杨树菇泡1小时后加盐充分清洗干净。
2、将生姜切成厚片。
3、起净锅，将锅烧干，以中火将5花肉的皮烙黄。
4、把5花肉的皮用刀刮洗干净后切成方块。
5、起炒锅，放油，中小火，油热后把红糖放入炒化。
7、调入酱油、蠔油、翻炒均匀。
8、往锅里注入能没住5花肉的开水。
9、将食材全部移至砂锅，大火烧开3分钟后，又小火加盖焖烧1个半小时。1
0、加入杨树菇，调入适量盐1起焖烧半小时，中途翻动均匀。1
1、将青蒜苗洗净后切成段。1
2、以大火将砂锅内水分收干，调入老抽翻动均匀，再放入青蒜苗翻动均匀，关火。
3、杨树菇怎么进行适时采收？
在华中地区及长江流域气候条件下，最佳栽培季节是8月中旬至9月下旬长出第1批菇，2月下旬至4月上旬播种，5月中旬长1潮菇。子实体菌盖圆形，直径4～10厘米左右，菌柄中实、子实体从发生到最后均呈玉色。当菌膜未开，菌盖内卷时便可适时采收。气温偏高时每天就采摘几次，以不致降低其商品性。白杨树菇在15～25℃时出菇快，结菇多，每袋第1批可采收100～140克，第
3、4潮菇产量并不会降低，但出了
3、4潮菇之后，菌袋偏干，此时菌袋补水时应补充营养液，能克服后期出菇不足现象，促进增产。栽培方法可采用袋栽灌水与脱袋覆土等方法。生物效率可达80%～100%。
4、怎样进行杨树菇的发菌管理？
在华中地区及长江流域气候条件下，最佳栽培季节是8月中旬至9月下旬长出第1批菇，2月下旬至4月上旬播种，5月中旬长1潮菇。子实体菌盖圆形，直径4～10厘米左右，菌柄中实、子实体从发生到最后均呈玉色。当菌膜未开，菌盖内卷时便可适时采收。气温偏高时每天就采摘几次，以不致降低其商品性。白杨树菇在15～25℃时出菇快，结菇多，每袋第1批可采收100～140克，第
3、4潮菇产量并不会降低，但出了
3、4潮菇之后，菌袋偏干，此时菌袋补水时应补充营养液，能克服后期出菇不足现象，促进增产。栽培方法可采用袋栽灌水与脱袋覆土等方法。生物效率可达80%～100%。
5、杨树菇如何干制？
杨树菇干品风味亦好，目前杨树菇的加工以干制为主。干制方法有晒干和烘干两种。1.晒干 采下杨树菇要除去基部的培养基，为了尽快晒干，最好将整丛的子实体分开，1般在太阳下晒2～3天即可，含水量在12%以下。此法经济、成本低，但品质欠佳，不耐贮存。为了提高干品质量，最好是在阳光下晒干1天后当晚及时烘干，以防隔夜后菇体变黑。晒干后的杨树菇要用塑料袋密封保存。2.烘干 烘干的杨树菇品质好，且可较大规模生产，烘干的菇体含水量较低，较耐贮存。烘烤时，先将烘干室预先加热到40℃左右，排除内部湿气。然后将新鲜菇体送入烘烤室内，开始1～2小时室温保持30℃左右，随后将温度调到45～50℃，5小时左右后再调到60℃左右，继续烘3小时左右即可。烘干过程中，要注意烘烤室内的通风换气以保证烘烤的质量。烘干后菇体含水量在10%以下。冷却后，用塑料袋密封保存。杨树菇干品吸湿性强易返潮，所以贮藏要注意密闭。
6、杨树菇的做法有什么？
嫩豆腐 1/4块 红烧豆腐 甜豆 15公克 红甜椒 1/4个 杨树菇4朵 青葱 1根 蔬菜高汤 100cc 盐 适量 素蚝油 1大匙 鲜味露 适量 制作流程 1. 新鲜杨树菇洗净切片，红甜椒洗净切块，连同甜豆以加了适量盐的沸水汆烫后随即捞起，冲冷水待凉，青葱洗净切段备用。 2. 嫩豆腐以沸水快速汆烫过后冲冷放凉，再切成3×3×1公分大小备用。 3. 取锅放入蔬菜高汤及蚝油煮至滚沸，加入作法2的豆腐以小火煮2分钟后，放入作法1的材料煮匀即可。
