银耳栽培技术
1、孢子弹射分离 银耳种耳的要求应是出耳正常,朵大、朵形好、肉厚、片大、色白、开片正常、无杂菌、无病害、八成熟的子实体选择备用。 取烧杯4只,以及不锈钢钩、接种针、剪刀、镊子、无菌水、无菌纱布、酒精灯、0.l%的升汞溶液,连同装有马铃薯菇琼脂培养基的三角瓶、种耳等放入接种箱,用福尔马林10毫升和高锰酸钾10克混合熏蒸,消毒灭菌30分钟,先将3只烧杯用酒精消毒后,各倒入无菌水若干,另回只烧杯倒入0.1%的升汞溶液。 用剪刀剪数片肉厚、片大的耳瓣,在升汞溶液中浸5~10秒钟,迅速依次放人3只无菌水烧杯中,各浸洗1分钟,再用无菌纱布将水吸干,用钢钩迅速挂于三角瓶内,塞上棉塞。 为防杂菌感染,耳片距培养基约3厘米左右。置于恒温箱,温度保持在23℃~25℃,培养24小时,可在培养基表层看到雾状的孢子卵,这时可在接种箱内,取出钢钩及耳片,塞好棉塞,继续培养2-3天后,培养基表面可看到白色糊状,边缘光滑,中间凸起的菌落,这就是银耳孢子。若无杂菌可采取划线法或稀释法,获得纯芽孢后再进行扩大 。
2、香灰菌丝分离 取子实体长得理想的耳木一段(段木栽培银耳的木段), 去掉耳基及树皮,用75%的酒精表面擦洗,杀死附在耳木表面的杂菌,移入装有敌敌畏或乐果的容器中过夜,以便杀死或驱跑耳基周围的虫害和螨类等。 取烧杯4只,1只倒入0.1%的升汞溶液,3只倒入无菌水,连同酒精灯、无菌刀、接种针、无菌纱布、斜面试管 和经过消毒的耳水,放入接种箱内,进行消毒灭菌。先将耳木浸入升汞药液内20秒钟左右,再移入3个无菌水的烧 中顺序洗3遍,然后用无菌纱布吸干水分,用无菌刀去掉耳木表面老菌丝,将耳木中间有黑色花纹处搞碎,用接种外挑取麦粒大小一块,迅速移入斜面试管里,塞上棉塞,用此法接完所有试管,一次必须多接一些试管,以便筛选提纯。然后移入电热恒温箱中,温度保持在23℃~25℃,2-3天后即可长出香灰菌丝。若发现有红、绿、黄等均为杂菌感染,应及时淘汰。纯香灰菌丝色白,粗短,爬壁力强。分离后要根据其爬壁力强的特点,及时转管高纯,便可得到理想的香灰菌丝。
3、银耳菌丝与香灰菌混合 选由芽孢萌发的银耳菌丝扩接数支,当试管里米粒大的银耳菌丝长至黄豆大小时(2℃~24℃培养6~8天),接入香灰菌丝。配接时,挑取香灰管的先驱菌丝,约米粒大,接于银耳菌落旁边距0.5厘米处。两天后出现白色菌丝,7天后出现浓白色的粗短菌丝团(白毛团)12~15天左右,在白毛团上方出现红黄水珠 。
4、银耳原种交合 获得较纯的银耳芽饱和香灰菌丝后,要进行交合,然后才能用于母种及栽培种的生产。交会的方法是:先将银耳接种在试营的培养基上,在23℃~25℃的环境中培养5~7天,待银耳菌丝长到黄豆大小时,再接入少许香灰菌丝,在同样温度下,培养7~10天,待香灰菌丝蔓延全试管时即为原种。
5、母种的培养 灭菌后放于干净通风处冷却。然后用无菌操作法,将试管原种接入母种培养基。接种工作完成后,应立即移入恒温室培养。将接好菌放人恒温室的母种菌瓶,直立于架子上,温度 保持在23℃~25℃,经3-4天培养,菌丝就会前发。这时每天要进行观察一次,直至银耳菌丝覆盖培养基表面为止。观察中若发现长得极快的是毛霉、根霉、木霉菌感染,绿、黄、黑为青霉和各种曲霉,都应及时淘汰。在正常温度下,培养15天左右,接种块出现浓白色的发育菌丝;20天左右菌丝扭结,并有红黄色水珠出现;待出现子实体原基时,便可进行扩大生产 。