如何进行灵芝母种的接种?

如何进行灵芝母种的接种?

1、如何进行灵芝母种的接种?

灵芝接种:将所需要的灵芝菌种移植到适宜其繁殖生长的培养基的操作。灵芝母种的接种:即为原始菌种,也称为一级菌种,是从灵芝孢子分离或组织分离所获得的纯菌丝体。灵芝母种的扩大培养也称作继代培养,或称移植、转接、转管等。自行分离或引进的原始菌种,一般数量很少,不直接用做培养原种,需进行扩大转接,一部分用来继续转接母种,一部分用于保藏。从保藏条件下转管活化扩大培养的菌种,也为一级母种,可直接转入原种生产。母种培养一般常用玻璃试管培养基培养,便于观察、鉴别,且易于保藏。(1)接种前的准备工作母种的接种操作,一定要严格按照无菌操作规程。接种前接种室、接种箱或洁净工作台都应打扫干净,用湿布擦拭桌面。洁净工作台应用75%的酒精棉球擦拭干净,接种工具和灭过菌的培养基有次序地摆在台上,接种室便可开启紫外灯照射,或用高锰酸钾—福尔马林熏蒸,洁净工作台应启动30分钟。操作人员用肥皂水洗净手后,换穿接种专用工作服、帽和拖鞋,方可进入接种间操作。(2)接种操作进入接种室后,先用75%的酒精棉球擦拭手部,风干后即可点燃酒精灯,将一支母种与一支待接培养基试管放在左手掌心,再用手指夹紧试管,右手拿接种针,将管口棉塞扭动并稍拉出一些,针头和下部外杆蘸酒精后在酒精灯火焰上烧灼灭菌。用无名指和小指,或小指与手掌配合夹住两个试管的棉塞并拔出,试管在火焰上灼烧,管口尽量靠近火焰的无菌区,将接种针迅速插入原种试管内,为防止烧灼的针头烫死菌种,可将针头先接触管壁上的蒸发水滴或未长菌丝的培养基边沿,然后迅速挑取豆粒大小的一块菌索连同少量培养基,移入待接试管培养基的中部,移菌时不能让挑取的菌种接触管壁。取出接种针,将两个试管口在火焰上烧灼,棉塞塞入试管内部分也在火焰上微燎并迅速塞入各自试管口(图8)。一支母种可扩大转接20支左右试管。图8 母种接种方法示意图

1、接种工具灭菌

2、拔棉塞

3、烧试管口

4、挑取菌种

5、接种

6、烧试管口

7、塞棉塞

8、接种完毕。

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